如何判断悬浮细胞培培养时，细胞是死的还是活的

一般培养的悬浮细胞的确容易出现这个情况。我养过的悬浮细胞种类不多，就个人经验而言。

1.从复苏细胞开始，要了解细胞的生长周期，尤其是出现指数生长期的时间段。尽量将细胞控制在一个合理的培养阶段，不要贪图省力贸然将细胞培养密度调小，或者认为过一个周末多个半天不处理也没有关系；除非你已经做过生长周期的确认；

2.有些悬浮细胞在平面培养环境中，会贴服在培养表面，虽然不会像贴壁细胞一样，但也不容易飘起来，但是在不断传代中会出现贴壁越来越差的情况，这个时候需要小心控制，仅保留贴壁的细胞传代，这样细胞就可以弃上清处理，死细胞或者分化的细胞就可以去掉

3.控制传代次数，复苏与冻存的记录要清楚，否则细胞状态很不稳定。

4.分化过程中如果出现过多的变异细胞，尤其是演变成完全贴壁的细胞（出现类伪足），建议不要用了，重新复苏。

一般这样处理的细胞的培养液还是比较干净的。个人实验经验，仅供参考。